實(shí)驗(yàn)室用低溫操作臺(tái)制備樣品是各類(lèi)實(shí)驗(yàn)的常用操作。低溫潔凈工作臺(tái)制備具有生物活性的大分子核酸.必須采取溫和的制備條件.避免過(guò)酸、過(guò)賊的反應(yīng)環(huán)境

實(shí)驗(yàn)室用低溫操作臺(tái)制備提取DNA的過(guò)程

在低溫潔凈工作臺(tái)無(wú)論從什么材料中提取DNA.都包括以下基本過(guò)程

1. 在低溫潔凈工作臺(tái)破碎細(xì)胞。

2. 在低溫潔凈工作臺(tái)上進(jìn)行加人蛋白酶消化液 (含有蛋白酶K .SDS和EDTA)。SDS可以破壞細(xì)胞膜和核膜,并可使DNA上結(jié)合的蛋白質(zhì)與DNA分離，在不產(chǎn)生機(jī)械剪切力的前提下盡可能保持DNA的完整性，EDTA可以抑制Dnase的活性,蛋白酶K可以將蛋白質(zhì)水解成小肽或氨基酸,蛋白酶K在SDS和EDTA存在的情況下仍可保持很高的酶活性。

3. 加RNase以去除RNA。

4. 用苯酚-氯仿抽提法等反復(fù)抽提,使DNA進(jìn)入水相與蛋白質(zhì)組分分開(kāi)。

5. ⑤收集上清液后用乙醉沉淀DNA.最后用TE級(jí)沖液溶解DNA.可用于DNA的含量及純度的測(cè)定、PCR擴(kuò)增、分子克隆操作等。

實(shí)驗(yàn)室用低溫操作臺(tái)真核生物組織細(xì)胞基因組 DNA的提取

1. 苯酚-氯仿抽提法酚、氣仿是有機(jī)溶劑,能有效地使蛋白質(zhì)變性。

2. 純酚的比重為1. 07,因此在與水混合時(shí)應(yīng)處于下層。然而有機(jī)相和水相會(huì)難于分開(kāi),甚至當(dāng)從溶質(zhì)濃度較高的水相中抽提蛋白時(shí)會(huì)發(fā)生兩相顛倒的情況。

3. 若使用份:氯仿混合物抽提,由于氯仿的比重較大 (1. 47),可在很大程度上解決這個(gè)問(wèn)題.促進(jìn)兩相的分離。

4. 異戊醇則可減少操作過(guò)程中產(chǎn)生的氣泡。變性蛋白-般集中在兩相之間的界面層，而脂類(lèi)則有效地分配在有機(jī)相中.核酸則被留于上層水相。

5. 該法具有操作條件比較溫和,能迅速使蛋白質(zhì)變性并同時(shí)抑制核酸酶的活性,可得到具有生物活性的高聚合度的核酸等優(yōu)點(diǎn)。但其操作步驟較為繁瑣，去除蛋白質(zhì)需要反復(fù)進(jìn)行多次.費(fèi)時(shí),所得到的核酸仍有部分降解。

在低溫操作臺(tái)、實(shí)驗(yàn)室用低溫操作臺(tái)、低溫潔凈工作臺(tái)上制備具有生物活性的大分子核酸，都需要經(jīng)過(guò)以上過(guò)程。四度醫(yī)療為實(shí)驗(yàn)室低溫操作臺(tái)廠家，可提供低溫操作臺(tái)價(jià)格和詳細(xì)使用說(shuō)明，并可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室用低溫操作臺(tái)的定制。